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DNA快速提取检测试剂盒图片
产品货号:
WH0010
中文名称:
DNA快速提取检测试剂盒
英文名称:
DNA Rapid Extraction and Detection Kit
产品规格:
50次|200次|2000次
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本试剂盒采用独特的包装体系,包含了快速制备基因组DNA和PCR扩增的所有试剂,适用于从植物组织、种子、动物组织、血液样品、酵母和细菌中一步法提取基因组DNA并用于后续的PCR扩增和检测。整个提取过程不包含去蛋白、去RNA及其它次生代谢物的过程,无需有机溶剂抽提,无需无水乙醇沉淀,简便、快捷,而且质量稳定可靠。

本试剂盒提供的2×PCR MasterMix是一种扩增兼容性很强的PCR试剂,无需彻底去除蛋白等杂质,便能进行高效特异扩增,该试剂包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应的增强剂和优化剂及稳定剂。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等特点,特别适合于高通量的筛选。

产品特点:
·简单快速:无需液氮,5min即可快速提取各种组织DNA。
·材料广泛:适用于植物叶片、种子、动物组织、血液样品(新鲜血、抗凝血、血凝块、干血斑等)、酵母和细菌等材料。
·兼容性强:PCR试剂适用于提取的各种来源样本的DNA扩增。
·基因检测:特别适合大规模的基因检测

试剂盒组成:
组分50T200T
缓冲液B16ml24ml
缓冲液B26ml24ml
2×PCR MasterMix500μl2×1ml
研磨杵10个20个

保存条件:缓冲液B1和缓冲液B2在室温(15-25℃)干燥条件下可保存12个月;2× PCR MasterMix在-20℃条件下可长期保存,多次冻融不会影响活性,如需经常使用,可存放于4℃。

注意事项:(请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项)
1.样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。
2.对于类似于棉花叶片这种含有酚类较多的样品,应严格控制样品处理量不超过0.4mg,否则会影响PCR反应。
3.缓冲液B1和缓冲液B2应放置于室温保存,如放在低温(-20℃或4℃)保存时有沉淀析出,可在37℃水浴中重新溶解沉淀,并摇匀溶液后使用。
4.本产品提供的2×PCR Reagent为2×母液,使用时需加入模板和引物,并加入灭菌水补足体积,使其浓度为1×即可进行反应。

使用方法:
1.第一次使用本试剂盒时,请仔细查看两种缓冲液中是否有结晶析出,如有结晶请将两种缓冲液于室温充分平衡至结晶完全溶解,或在37℃水浴中重新溶解沉淀后使用。两种缓冲液溶解后在室温保存。
2.取少量样品(具体加入量参考附表1)于1.5 ml的离心管中,加入100 μl缓冲液B1,确保缓冲液可以完全覆盖样品。
3.用研磨杵(目录号:WH9003)将样品捣碎。
  注意:若样品为血液、菌液等液体样,可用研磨杵反复研磨30 sec至样品与缓冲液B1混匀即可;若样品为不易捣碎的植物种子、皮肤组织、结缔组织等,可用研磨杵(推荐配合电动组织研磨器进行捣碎更方便)尽量研磨至溶液浑浊变色即可(如新鲜叶片研磨后溶液由澄清变为绿色,即使溶液中有可见固状物存在也不影响结果)。
4.样品捣碎后,加入100 μl缓冲液B2,震荡混匀,12000rpm (~13400×g )离心2 min。
5.离心结束后,小心吸取100 μl上清液于另一干净的1.5 ml离心管中作为模板备用。
6.PCR扩增反应。

反应体系(以20μl体系为例):
加入物加入量
2× PCR MasterMix10 μl
正向引物(10μM)0.5μl
反向引物(10μM)0.5μl
模板DNA1μl
ddH2O补至20 μl

试剂全部加好后,混匀后瞬时离心,将所有试剂收集到管底。

参考反应条件:
PCR反应条件

结果检测:
反应结束后取5-10 μl反应产物,琼脂糖凝胶电泳检测。
注意:举例仅供参考,实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异,需根据实际情况设定最佳反应条件。
注意:在操作中如发现管壁或管盖上有液体可以瞬时离心将其甩至管底。

附表1:
样品名称处理量
植物叶片1-5mg
植物种子去除种皮后的样品1-5mg
动物组织1-5mg
细菌样品0.2-0.5ml菌液收集物
酵母样品0.2-0.5ml菌液收集物
血液样品20μl

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